背景:

中國(guó)藥典2015版中只有提出隔離系統(tǒng)除菌驗(yàn)證的標(biāo)準(zhǔn)為“用于隔離器、實(shí)驗(yàn)物品的滅菌方法應(yīng)能達(dá)到或超過(guò)使生物指示劑下降6個(gè)對(duì)數(shù)值的效果”，但并未給出具體的除菌參數(shù)及驗(yàn)證方法。其根本原因在于隔離器的除菌效果受到多種因素的影響，比如氣體發(fā)生器，隔離器腔體結(jié)構(gòu)、除菌氣體類型、除菌時(shí)間、除菌濃度、對(duì)應(yīng)的溫濕度、壓力等，即使是同一批次生產(chǎn)的隔離器，氣體發(fā)生器也是有所不同。PIC/S Isolators used for aseptic processing and sterility testing中指出在無(wú)法證明氣體發(fā)生器的氣體除菌過(guò)程是相同的情況下，則要求將氣體發(fā)生器當(dāng)成不同的設(shè)備對(duì)待，也就是說(shuō)每1臺(tái)隔離器應(yīng)該進(jìn)行單獨(dú)的除菌循環(huán)開(kāi)發(fā)及驗(yàn)證。

隔離器除菌循環(huán)開(kāi)發(fā)目的在于確定隔離器日常除菌程序中所必需的過(guò)程控制參數(shù)。開(kāi)發(fā)測(cè)試項(xiàng)目至少包括以下幾個(gè)方面，隔離器中除菌試劑的分布以及除菌時(shí)間和除菌程序完成以后的除菌試劑排空時(shí)間。

測(cè)試原理:

除菌循環(huán)開(kāi)發(fā)：

1.氣體分布性：在隔離器內(nèi)布置化學(xué)指示劑，尤其注意部分依靠氣體被動(dòng)擴(kuò)散的區(qū)域或者容易被遮擋的區(qū)域，用于檢測(cè)除菌氣體的分布性。

2.隔離器除菌參數(shù)確定：在除菌氣體分布優(yōu)差的位置進(jìn)行生物指示計(jì)布點(diǎn)。設(shè)置合適的除菌濃度、溫度、濕度，過(guò)長(zhǎng)的除菌時(shí)間等除菌參數(shù)，采用部分陰性法或存活曲線法測(cè)定生物指示劑在該條件下的D值。則空載情況下隔離器的優(yōu)終除菌時(shí)間=6倍*生物指示劑的D值*保險(xiǎn)系數(shù)S_空，S_空大于1.0.滿載情況下，隔離器的優(yōu)終除菌時(shí)間=6倍*生物指示劑的D值*保險(xiǎn)系數(shù)S_滿，S_滿大于S_空。該除菌時(shí)間優(yōu)終還需要通過(guò)除菌驗(yàn)證，否則需調(diào)整保險(xiǎn)系數(shù)。

3. 通風(fēng)排殘時(shí)間確定：通風(fēng)后應(yīng)保證濃度低于職業(yè)接觸限值，可用電化學(xué)傳感器或化學(xué)指示劑檢測(cè)。

除菌驗(yàn)證：

運(yùn)行一個(gè)滅菌循環(huán)，以確認(rèn)滅菌循環(huán)各階段實(shí)際運(yùn)行值與其設(shè)定值是否相符。根據(jù)隔離器的內(nèi)腔容積進(jìn)行生物指示計(jì)布點(diǎn)，布點(diǎn)原則為5個(gè)/m3，優(yōu)少布5個(gè)點(diǎn)，均勻分布于內(nèi)表面，尤其在氣體除菌劑分布較低的位置。啟動(dòng)隔離器，先對(duì)腔體內(nèi)部進(jìn)行除濕和汽化單元進(jìn)行預(yù)熱，按照除菌運(yùn)行參數(shù)運(yùn)行，End進(jìn)行通風(fēng)排殘。滅菌結(jié)束后取出測(cè)試樣本，均放到相應(yīng)培養(yǎng)基中，在合適條件下培養(yǎng)，觀察微生物生長(zhǎng)結(jié)果。未經(jīng)過(guò)滅菌周期的生物指示劑同條件下培養(yǎng)作為陽(yáng)性對(duì)照。將不含生物指示劑的TSB培養(yǎng)物作為陰性對(duì)照同條件培養(yǎng)。所采用的滅菌參數(shù)及循環(huán)程序應(yīng)能使隔離器內(nèi)表面或無(wú)菌器具暴露的外表面上高耐受性的生物指示劑下降6個(gè)對(duì)數(shù)單位，并具有重現(xiàn)性。隔離器內(nèi)物品和設(shè)備滿載時(shí)需要用更多的生物指示劑進(jìn)行試驗(yàn)。

方法參考:

<中國(guó)藥典>2015版  9206無(wú)菌檢查用隔離系統(tǒng)驗(yàn)證指導(dǎo)原則

<中國(guó)藥典>2015版 通則 1421

PIC/S Isolators used for aseptic processing and sterility testing

USP<1208>Sterility Testing-Validation of Isolator System/General informance

PDA TR34 Design and Validation of Isolator Systems for the manufacturing and testing of Health care Products.

JB/T 20175-2017 無(wú)菌隔離器

樣品要求:

除菌循環(huán)開(kāi)發(fā)及驗(yàn)證：現(xiàn)場(chǎng)或隔離器寄送